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正常組織細(xì)胞操作有以下步驟

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正常組織細(xì)胞操作步驟

1. 包被:pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔,放4℃,36小時(shí)。

2. 封閉:0.1%吐溫PBS(Buffer A)沖洗96孔板三次,加3%BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔,放37℃,1小時(shí)。

3. 加待檢樣品:Buffer A 沖洗96孔板三次,加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品100μl/孔,放37℃,3小時(shí)。

4. 加酶標(biāo)抗體:Buffer A沖洗96孔板五次,3%PEG Buffer A稀釋酶標(biāo)抗體至1∶800,加入96孔板,100μl/孔,放37℃,1小時(shí)。

5. 顯色:Buffer A沖洗96孔板五次,pH5.4檸檬酸緩沖液溶解底物(ABTS),0.2mg/ml,加3%H2O2,2μl/ml,加入96孔板,100μ/孔,室溫下或37℃顯色。

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